本品为苋科植物牛膝 Achyranthes bidentata Bl.的干燥根。冬季茎叶枯萎时采挖，除去须根和泥沙，捆成小把。晒至干皱后，将顶端切齐，晒干。本研究共收集了30份药材（NX-YC-01～NX-YC-30），采自主产区、道地产区，经广东一方制药有限公司魏梅主任中药师鉴定，研究样品均为《中国药典》2015年版一部“牛膝”项下规定的品种。

照《中国药典》2015年版一部“牛膝”饮片项下进行炮制，取牛膝原药材，除去杂质，洗净，润透，除去残留芦头，切断，干燥即得牛膝饮片（NX-YP-01～NX-YP-30）。

牛膝药材呈细长圆柱形，挺直或稍弯曲，长15～70cm，直径0.4～1cm。表面灰黄色或淡棕色，有微扭曲的细纵皱纹、排列稀疏的侧根痕和横长皮孔样的突起。质硬脆，易折断，受潮后变软，断面平坦，淡棕色，略呈角质样而油润，中心维管束木质部较大，黄白色，其外周散有多数黄白色点状维管束，断续排列成2～4轮。气微，味微甜而稍苦涩。

牛膝饮片呈圆柱形的段。外表皮黄色或淡棕色，有微细的纵皱纹及横长皮孔。质硬脆，易折断，受潮变软。切面平坦，淡棕色或棕色，略呈角质样而油润，中心维管束木部较大，黄白色，其外围散有多数黄白色点状维管束，断续排列成2～4轮。气微，味微甜而苦涩。见图8-2-1。

按照《中国药典》2015年版一部“牛膝”项下有关要求，对上述牛膝药材及饮片进行检测，所有样品均符合规定，测定结果见表8-2-1、表8-2-2。

色谱柱：CORTECS T3（100mm×2.1mm，1.6μm）；流动相：乙腈为流动相 A，0.05%甲酸溶液为流动相B；按表8-2-3规定进行梯度洗脱；流速：0.3ml/min；柱温：40℃；检测波长：270nm；进样量：1μl。理论板数按 β-蜕皮甾酮计算应不低于4 000。

取 β-蜕皮甾酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含 β-蜕皮甾酮25μg的溶液，即得。

取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入30%甲醇10ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用30%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

方法学考察合格（具体内容略）。

按牛膝药材及饮片特征图谱研究方法，分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各1μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

供试品溶液特征图谱中应呈现4个特征峰（图8-2-2、图8-2-3），以参照物峰相应的峰为S峰，计算各特征峰的相对保留时间（表8-2-4），其相对保留时间应在规定值的±10%之内，相对保留时间规定值为：0.188（峰 1）、1.032（峰 3）、1.058（峰 4）；计算各特征峰与 S 峰的相对峰面积，其相对峰面积应在规定范围内，规定值为：0.098～0.561（峰 1），0.194～0.340（峰 3），0.259～0.309（峰 4）。

按牛膝药材及饮片特征图谱研究方法，分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各1μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得（图8-2-4、图8-2-5）。

对30批牛膝饮片特征图谱进行分析，以 β-蜕皮甾酮峰为参照峰，计算其相对峰面积与相对保留时间，实验结果见表8-2-5。

本研究以《中国药典》2015年版一部“牛膝”项下质量标准为基础，研究制定了高于《中国药典》的药材和饮片标准，增加了重金属及有害元素含量的检测项；增加了牛膝药材特征图谱标准，并规定了4个特征峰的相对保留时间和相对峰面积范围。市面上除了通用的怀牛膝、川牛膝外，尚有土牛膝、杜牛膝、广东土牛膝、红牛膝、白牛膝、麻牛膝以及味牛膝等，诸药间常有混用、误用的情况，土牛膝在《本草纲目》中指各地野生的牛膝；杜牛膝为菊科天名精的根；广东土牛膝为菊科植物华泽兰的根，白牛膝为石竹科植物狗筋蔓 Cucubalus baccifer L.的干燥根；麻牛膝为苋科植物头花杯苋的根；红牛膝为柳叶牛膝 Achyranthes longifolia Makino的干燥根。麻牛膝及味牛膝都为川牛膝的误用品。各混用品所属的植物科属有差异，要注意区分。采用本研究所开发的牛膝药材特征图谱条件，对川牛膝、广东土牛膝和牛膝药材特征图谱进行比较，结果表明，三者差别较大，最主要表现为川牛膝和广东土牛膝均无 β-蜕皮甾酮峰。本方法为不同品种牛膝鉴别提供了依据。